CRISPR Cas9
Cas9可对基因组进行剪切,使DNA的双链断裂。在通常情况下,细胞会采用高效的非同源末端连接方式(NHEJ)对断裂的DNA进行修复。在修复过程中通常会发生碱基插入或缺失的错配现象,造成移码突变,使靶标基因失去功能,从而实现基因敲除。

Prime Editing(PE)
是在传统的CRISPR/Cas9基础上优化的技术,Prime Editing由两部分组成,一是nCas9和改造的逆转录酶融合构成的效应蛋白——Cas9 逆转录酶,其二是pegRNA。Prime Editing技术非常精确,它能够执行高度指定的删除、插入和碱基交换功能。

TALENs
TALE靶.点识别模块的构建;一对重组核酸酶在靶点识别结构域的作用下识别靶点核酸序列;Fokl结构域形成二聚体,发挥非特异性内切酶活性,剪切DNA然后形成DSB;诱发DNA损伤修复机制。

ZFN
作为人工合成的限制性内切酶通过其锌指DNA结合域、DNA切割域发挥作用。通过改造DNA的结合域,靶向定位于不同的DNA序列,再由DNA切割域进行特异性切割。

Cre-lox
利用Cre-lox系统,我们可以在特定细胞、组织或整个生物体,甚至在特定时间点敲除或表达某个基因,实现对特定基因的时空特异性操作,例如:反转、删除、易位。
